چگونه از میکروسکوپ پزشکی برای شمارش سلول استفاده کنیم؟

شمارش سلولی یک تکنیک اساسی در بسیاری از زمینه های تحقیقاتی زیست پزشکی، تشخیص بالینی و توسعه دارویی است. یک میکروسکوپ پزشکی ابزاری ضروری برای این کار است که به محققان و پزشکان اجازه می‌دهد تا سلول‌ها را به دقت تجسم و کمیت کنند. ما به عنوان یک تامین کننده پیشرو میکروسکوپ پزشکی، اهمیت استفاده صحیح از میکروسکوپ و تکنیک های شمارش سلولی را درک می کنیم. این وبلاگ شما را در فرآیند استفاده از میکروسکوپ پزشکی برای شمارش سلولی راهنمایی می کند.

انتخاب میکروسکوپ پزشکی مناسب

وقتی نوبت به شمارش سلول می رسد، انتخاب میکروسکوپ مناسب بسیار مهم است. شرکت ما انواع میکروسکوپ های با کیفیت بالا را برای نیازهای مختلف شمارش سلولی ارائه می دهد.

میکروسکوپ فلورسانس دوچشمی معکوس

رامیکروسکوپ فلورسانس دوچشمی معکوسیک انتخاب عالی برای مشاهده سلول های زنده در کشت است. با طراحی معکوس، لنزهای شیئی در زیر مرحله قرار دارند و امکان بررسی سلول‌ها در یک محیط مایع را در یک ظرف پتری یا صفحه چند چاهی فراهم می‌کنند. عملکرد فلورسانس تجسم اجزای سلولی خاص یا مولکول های برچسب گذاری شده با رنگ های فلورسنت را امکان پذیر می کند، که به ویژه برای جداسازی و شمارش انواع مختلف سلول مفید است.

میکروسکوپ فلورسانس پزشکی Widefield

برای تجزیه و تحلیل سلولی جامع تر،میکروسکوپ فلورسانس پزشکی Widefieldمیدان دید وسیعی را فراهم می کند و امکان غربالگری سریع سلول را فراهم می کند. می‌تواند ناحیه وسیعی از نمونه را روشن کند و شمارش تعداد بیشتری سلول را در یک زمان آسان‌تر کند. گزینه فلورسانس همچنین توانایی تمایز بین جمعیت های سلولی مختلف را بر اساس سیگنال های فلورسانس آنها افزایش می دهد.

میکروسکوپ ترکیبی حرفه ای

اگر کار شما شامل بررسی مقاطع بافت نازک یا اسمیر است،میکروسکوپ ترکیبی حرفه اییک گزینه عالی است بزرگنمایی و وضوح بالایی را ارائه می دهد و امکان مشاهده دقیق سلول های جداگانه را فراهم می کند. این نوع میکروسکوپ معمولاً در آزمایشگاه های پاتولوژی برای شمارش سلولی در نمونه های بافتی استفاده می شود.

میکروسکوپ بیولوژیکی پزشکی با بزرگنمایی بالا سری PH100

رامیکروسکوپ بیولوژیکی پزشکی با بزرگنمایی بالا سری PH100برای شمارش سلولی با دقت بالا طراحی شده است. با اپتیک با کیفیت بالا و بزرگنمایی قابل تنظیم، می تواند ساختارهای سلولی را به وضوح نمایش دهد و برای شمارش سلول ها با مورفولوژی های مختلف مناسب است.

میکروسکوپ دیجیتال آزمایشگاه زیست شناسی

رامیکروسکوپ دیجیتال آزمایشگاه زیست شناسیترکیبی از مزایای میکروسکوپ سنتی با فناوری دیجیتال است. این می تواند تصاویر و فیلم هایی از سلول های در حال شمارش را بگیرد که برای مستندسازی و تجزیه و تحلیل بیشتر راحت است. صفحه نمایش دیجیتال همچنین امکان اشتراک گذاری آسان نتایج را با همکاران فراهم می کند.

آماده سازی میکروسکوپ و نمونه ها

قبل از شروع شمارش سلولی، آماده سازی میکروسکوپ و نمونه ها به درستی ضروری است.

آماده سازی میکروسکوپ

1. لنزها را تمیز کنید: از کاغذ لنز و یک پاک کننده لنز مناسب استفاده کنید تا به آرامی لنزهای شیئی، لنزهای چشمی و لنزهای کندانسور را پاک کنید. گرد و غبار یا زباله های روی لنزها می تواند دید را مبهم کند و بر دقت شمارش سلول ها تأثیر بگذارد.
2.  
3. نور را تنظیم کنید: منبع نور میکروسکوپ را روشن کنید. شدت نور و موقعیت کندانسور را برای رسیدن به روشنایی مطلوب تنظیم کنید. برای میکروسکوپ نور عبوری، نور باید به طور مساوی در سراسر میدان دید توزیع شود.
4. میکروسکوپ را کالیبره کنید: اگر از میکروسکوپ با تنظیمات بزرگنمایی متفاوت استفاده می کنید، برای اطمینان از اندازه گیری دقیق اندازه سلول، باید آن را کالیبره کنید. این کار را می توان با استفاده از میکرومتر مرحله و میکرومتر چشمی انجام داد.
5.  

آماده سازی نمونه

1. تعلیق سلولی: اگر سلول‌ها را در یک سوسپانسیون می‌شمارید، مطمئن شوید که سلول‌ها به خوبی پراکنده شده‌اند. می‌توانید به آرامی سوسپانسیون را به سمت بالا و پایین پیپت کنید تا توده‌های سلولی شکسته شوند.
2.  
3. آماده سازی اسلاید: برای اسمیر سلولی یا برش بافتی، نمونه را روی یک لام شیشه ای تمیز قرار دهید. یک ورقه پوششی در بالا اضافه کنید، مراقب باشید که از حباب های هوا جلوگیری کنید. در صورت لزوم، از یک محیط نصب برای محکم کردن پوشش و نگهداری نمونه استفاده کنید.
4. رنگ آمیزی: رنگ آمیزی می تواند دید سلول ها و ساختار داخلی آنها را افزایش دهد. لکه‌های رایج برای شمارش سلولی شامل هماتوکسیلین و ائوزین (H&E) برای مورفولوژی سلولی عمومی و لکه‌های فلورسنت برای نشانگرهای سلولی خاص است.
5.  

انجام شمارش سلولی

پس از آماده شدن میکروسکوپ و نمونه ها، می توانید فرآیند شمارش سلولی را آغاز کنید.

شمارش دستی سلول

1. بزرگنمایی مناسب را انتخاب کنید: با یک لنز شیئی با بزرگنمایی کم (مثلاً 10x) شروع کنید تا ناحیه مورد نظر را روی نمونه قرار دهید. هنگامی که ناحیه سلول‌ها را پیدا کردید، می‌توانید برای شمارش دقیق‌تر به یک لنز شیئی با بزرگنمایی بالاتر (مثلاً 40x یا 100x) بروید.
2.  
3. منطقه شمارش را تعریف کنید: می توانید از محفظه شمارش مانند هموسیتومتر یا محفظه Neubauer استفاده کنید که یک طرح شبکه ای روی سطح آن حک شده است. شبکه، ناحیه شمارش را به مربع‌های کوچک‌تر تقسیم می‌کند و می‌توانید سلول‌ها را در مجموعه‌ای از مربع‌های مشخص بشمارید.
4. سلول ها را بشمار: از طریق میکروسکوپ نگاه کنید و تعداد سلول ها را در ناحیه شمارش تعریف شده بشمارید. مطمئن شوید که از یک قانون شمارش ثابت پیروی می‌کنید، مانند شمارش سلول‌هایی که مرزهای بالا و چپ مربع را لمس می‌کنند، اما نه آنهایی که مرزهای پایین و راست را لمس می‌کنند تا از شمارش مضاعف جلوگیری شود.
5. غلظت سلول را محاسبه کنید: پس از شمارش سلول ها در ناحیه تعریف شده، می توانید غلظت سلول را در نمونه اصلی محاسبه کنید. به عنوان مثال، اگر سلول ها را در یک هموسیتومتر شمارش کردید، می توانید از فرمول زیر استفاده کنید:
   [Cell\ غلظت\ (cells/mL)=\frac{Number\ of\ counted\cell{Number\ of\ Squares\ counted\times\ Volume\ of\ one\ مربع}\times\ Dilution\ factor]
6.  

شمارش دیجیتال سلولی

اگر از میکروسکوپ دیجیتال استفاده می کنید، روند تا حدودی متفاوت است.

1. عکس یا فیلم بگیرید: از دوربین دیجیتال متصل به میکروسکوپ برای گرفتن عکس یا فیلم از سلول ها استفاده کنید. مطمئن شوید که تصاویر واضح و فوکوس هستند.
2. از نرم افزار شمارش سلولی استفاده کنید: بسیاری از برنامه های نرم افزار شمارش سلول موجود است که می تواند تصاویر گرفته شده را تجزیه و تحلیل کند و سلول ها را به صورت خودکار شمارش کند. این برنامه ها اغلب از الگوریتم هایی برای شناسایی و تشخیص سلول ها بر اساس اندازه، شکل و رنگ آنها استفاده می کنند.
3. نتایج را تأیید و تنظیم کنید: اگرچه نرم افزار شمارش سلول دیجیتال به طور کلی دقیق است، اما هنوز لازم است نتایج به صورت دستی تأیید شود. هر گونه مثبت یا منفی کاذب را در نرم افزار بررسی کنید - شمارش های تولید شده و در صورت لزوم تنظیمات را انجام دهید.
4.  

نکاتی برای شمارش دقیق سلول ها

برای اطمینان از صحت شمارش سلول، در اینجا چند نکته وجود دارد:

1. شمارش را تکرار کنید: چندین بار شمارش سلول ها و محاسبه میانگین می تواند خطای آزمایشی را کاهش دهد.
2. از توده های سلولی خودداری کنید: همانطور که قبلا ذکر شد، توده سلولی می تواند منجر به شمارش نادرست شود. قبل از شمارش مطمئن شوید که سلول ها به خوبی پراکنده شده اند.
3. نمونه را تمیز نگه دارید: آلودگی در نمونه می تواند در شمارش سلول ها اختلال ایجاد کند. در طول آماده‌سازی نمونه از لام‌ها، روکش‌ها و پیپت‌های تمیز استفاده کنید.
4. یک محیط ثابت را حفظ کنید: دما، رطوبت و شدت نور می تواند بر مورفولوژی و دید سلولی تأثیر بگذارد. سعی کنید محیط آزمایشی را تا حد امکان ثابت نگه دارید.
5.  

نتیجه گیری

استفاده از میکروسکوپ پزشکی برای شمارش سلولی ترکیبی از انتخاب صحیح میکروسکوپ، آماده سازی نمونه و تکنیک های دقیق شمارش است. به عنوان یک تامین کننده میکروسکوپ پزشکی، ما متعهد به ارائه میکروسکوپ های با کیفیت بالا و حمایت از مشتریان خود در دستیابی به نتایج دقیق شمارش سلول هستیم. اگر علاقه مند به خرید میکروسکوپ پزشکی برای شمارش سلولی هستید یا در مورد استفاده از میکروسکوپ و تکنیک های شمارش سلولی سؤالی دارید، لطفاً برای بحث بیشتر با ما تماس بگیرید. ما مشتاقانه منتظر کمک شما در زمینه تحقیقات و نیازهای تشخیصی هستیم.

مراجع

• مورفی، دی بی (2001). مبانی میکروسکوپ نوری و تصویربرداری الکترونیکی. وایلی - لیس.
• Krzewski، M.، & Carraway، KL (2001). زیست شناسی سلولی: کتاب راهنمای آزمایشگاهی. مطبوعات دانشگاهی.
• پرسکات، دی.ام.، و اپستین، ال. (1993). روش ها در زیست شناسی سلولی. مطبوعات دانشگاهی.